Molekularna dijagnoza odgovara nizu molekularnih tehnika kojima je cilj identificirati promjene u DNA koja može biti indikativna za genetske bolesti ili rak, na primjer. Osim toga, molekularne tehnike se naširoko koriste za identifikaciju i potvrdu zaraznih bolesti, jer predstavljaju bržu i točniju dijagnostičku metodu.
Molekularna dijagnoza je skupe pa se stoga vrlo često ne traže liječnici, ali daje precizne rezultate glede prisutnosti promjene, načina na koji može utjecati na funkcioniranje organizma i pacijentov odgovor na bolest. tretman.
Za što je to
Molekularna dijagnoza može se provesti s nekoliko ciljeva, od kojih su glavne:
- Identifikacija mutacija povezanih s leukemijom, kao što je identifikacija BCR-ABL translokacije koja je karakteristična za kroničnu mijeloičnu leukemiju (CML);
- Na primjer, mutacije karakteristične za hematološke bolesti kao što su nasljedna hemokromatoza, policitemija vera, esencijalna trombocitemija i trombofilija - razumjeti što je trombofilija i kako se liječenje radi;
- Molekularne promjene koje upućuju na pojavu raka, kao što su rak debelog crijeva, pluća, raka dojke i mozga, na primjer;
- Dijagnoza zaraznih bolesti kao što su hepatitis, uretritis, toksoplazmoza, leishmanijazu, itd., Osim identificiranja HPV virusa .
Molekularna dijagnoza, unatoč tome što je skupo u usporedbi s drugim dijagnostičkim tehnikama, točnije, jer je u stanju informirati promjenu povezanu s određenom bolesti i stupanj utjecaja ove promjene u organizam, čime se pomaže u liječenju osobe.
Osim što se koriste za dijagnozu različitih bolesti, molekularne tehnike se također koriste za procjenu odgovora na liječenje, osobito kod osoba s rakom, što je jedna od najučinkovitijih metoda za ukazivanje na evoluciju bolesti i relapsa.
Kako je to učinjeno
Molekularna dijagnoza može se provesti s bilo kojim uzorkom, a liječniku se traži da daju informacije o stanju bolesnika, što može biti urin, slina ili, većinu vremena, krv. Nije potrebno brzo niti bilo koji drugi priprema za ispit.
Uzorak se skuplja i šalje u laboratorij zajedno s liječničkim savjetom koji obavještava ispit ili vrstu istraživanja koja bi trebala biti učinjena. Izvedena molekularna tehnika ovisi o traženom ispitivanju i uključuje niz preciznih postupaka čiji je krajnji cilj identificiranje prisutnosti ili odsutnosti izmjene koje je zatražio liječnik.
Obično se koristi samo mala količina uzorka, a ostatak se pohranjuje tako da, ako je potrebno, test se ponovi.
Pogledajte što su glavne molekularne tehnike
PCR
PCR, kratica za reakciju polimeraznih lanaca, molekularna je tehnika koja se sastoji od pojačavanja fragmenta genetskog materijala, bilo da je to DNA ili RNA, s ciljem identificiranja mutacija i time pomažući u dijagnostici bolesti.
Ova tehnika je izrađena od ekstrakcije i pročišćavanja genetskog materijala, koja se zatim stavlja u smjesu u kojoj je jedna od komponenata restrikcijski enzim koji varira prema traženom ispitivanju i čija je funkcija da se materijal odreže u ulomke identificirati moguću genetsku promjenu. Smjesa se stavlja u termocikler, koji je uređaj koji djeluje kroz temperaturnu varijaciju koju je stručnjak pokazao prema ispitivanju i na taj način dopušta pojačanje genetskog fragmenta. U slučaju konvencionalnog PCR-a, nakon amplifikacije, PCR proizvod se podvrgava elektroforezi, koja je molekularna tehnika zasnovana na težini i veličini fragmenata, tj. Prema tim karakteristikama generira se uzorak traka, čija analiza je učinjena temelji se na bendu pozitivne kontrole, tj. u bendu za koji se zna da odgovara genetskoj promjeni.
PCR u stvarnom vremenu, također nazvan qPCR, je vrsta kvantitativnog PCR-a, tj. Osim identificiranja genetske promjene, može dati informacije o ekspresiji gena, tj. Koliko se promijenjen gen izražava u organizmu, i stoga se može koristiti za pomoć dijagnozi i praćenju liječenja. PCR u stvarnom vremenu ne zahtijeva elektroforezu, cijeli proces amplifikacije i analize genetskog materijala obavlja se aparatom, a rezultat tumači obučeni zdravstveni djelatnik.
sekvencioniranje
Sekvenciranje je molekularna tehnika koja se sastoji od određivanja nukleotidne sekvence DNA. Sekvenciranje se javlja iz reakcije slične PCR-u, međutim, u smjesi za pojačavanje, dodaju se nukleotidi modificirani dodavanjem fluorokroma, da se kao materijal pojačava, modificirani nukleotidi su inkorporirani u DNA i generirali nekoliko fragmenata, koji odgovara proizvodu sekvencioniranja.
Reakcijski produkt se stavlja u uređaj nazvan DNA sekvencerom, pri čemu su kao ulomci udareni laserom aparata, fluorokromi se uzbudi, emitirajući fluorescenciju, što je naznačeno aparatom pomoću vrhova, svaki odgovarajući vrh na nukleotid. Na kraju reakcije oprema će informirati DNA sekvencu, pomažući liječniku u dijagnozi genetskih bolesti.
