Bakterijska biokemija je dijagnostička tehnika koja omogućava brzu i jednostavnu identifikaciju pojave infekcija, jer je pomoću specifičnih tehnika bojenja moguće vizualizirati bakterijske strukture u mikroskopu.
Taj se test može provesti s bilo kojim biološkim materijalom, a liječnik mora navesti materijal za prikupljanje i analizu, a rezultat pokazuje da li je prisutnost ili odsutnost bakterija, kao i njihova količina i svojstva potvrđena.
Za što je to
Bakterijska biokemija je dijagnostički test koji se može provesti s bilo kojim biološkim materijalom i može se koristiti za brzo prepoznavanje bakterijskih infekcija:
- Seksualno prenosive bolesti kao što su gonoreja i klamidija, na primjer, penile ili vaginalne sekrecije koriste se za tu svrhu. Zbirka se vrši uporabom sterilnog štapića i kontraindicirana je za provođenje higijene genitalne regije 2 sata prije pregleda, niti za spolni odnos u 24 sata prije zbirke;
- Tonsilitis, jer je kroz prikupljanje izlučaka grla moguće identificirati gram-pozitivne bakterije odgovorne za upalu u amigdali, uz prisutnost streptokoknih bakterija;
- Infekcije u mokraćnom sustavu, koje se obavljaju analizom prvog mlaza urina;
- Tuberkuloza, u kojoj se sputum analizira;
- Infekcije u kirurškim zahvatima, jer je uobičajeno da se infekcije javljaju nakon operacija uslijed smanjenja imunološkog sustava osobe. Zbog toga se sakupljanje sekrecije rana s sterilnim štapićem može naznačiti da bi se potvrdila moguća prisutnost bakterija na mjestu;
- Ozljede kože ili noktiju, koje se sastoje od prikupljanja površinskog uzorka, da ne koriste kreme i emajli najmanje 5 dana prije pregleda. Iako se može izvesti bakterioskopija, gljivice se obično promatraju kod ispitivanja uzorka nokta, na primjer.
Osim toga, bakterioskopija se može koristiti za pomoć u dijagnozi bakterijskog meningitisa, bolesti dišnog sustava i gastrointestinalnog trakta, a može se provesti biopsijom ili analnim materijalom.
Dakle, bakterioskopija je laboratorijska tehnika koja se može koristiti u kliničkoj praksi za dijagnosticiranje bolesti uzrokovanih bakterijama, ukazujući na karakteristike uzročnika bolesti i time dopuštajući liječniku da započne liječenje i prije identifikacije u laboratoriju, što može potrajati oko 1 tjedan.
Kako se to radi?
Laboratorijska analiza bakterioskopije obavlja se, a materijal prikupljen od pacijenta analiziran je u mikroskopu kako bi se istražio odsutnost ili prisutnost bakterija, uz njegove karakteristike.
Priprema za polaganje ispita ovisi o materijalu koji će se prikupljati i analizirati. U slučaju vaginalnog materijala, ženama se ne preporučuje higijenje 2 sata prije pregleda, a ne da se provede u posljednja 24 sata, dok je u slučaju sakupljanja noktiju ili kože, preporučljivo ne proći emajl, kreme ili tvari na koži prije pregleda.
U slučaju uzorka vaginalne sekrecije, primjerice, obrisak koji je korišten za izradu zbirke propušten je kružnim pokretima na slajdu, koji se mora identificirati pacijentovim inicijalima, a zatim obojiti bojanjem gram. U primjeru uzorka sputuma, koji je materijal sakupljen uglavnom radi potvrde prisutnosti bakterija odgovornih za tuberkulozu, bojenje upotrijebljeno u bakteriskopiji je Ziehl-neelsen, što je specifičnije za ovu vrstu mikroorganizama.
Normalno, kada se potvrdi prisutnost bakterija, laboratorij obavlja identifikaciju mikroorganizma i antibiograma, dajući potpuniji rezultat.
Kako je napravljena Gram mrlja?
Bojenje gram je jednostavna i brza tehnika bojanja koja omogućuje diferencijaciju bakterija prema njihovim karakteristikama, omogućujući diferencijaciju bakterija u pozitivne ili negativne prema njihovoj boji, omogućujući njihovu vizualizaciju pod mikroskopom.
Ova metoda bojenja koristi dvije glavne boje, jednu plavu i jednu ružičastu boju, koje mogu brtviti bakterije ili ne. Bakterije obojane plavom bojom se smatraju gram-pozitivnim, a one u ružičastu nazivaju gram-negativne. Iz ove klasifikacije, moguće je da liječnik započne preventivno liječenje, čak i prije identifikacije mikroorganizma.
Shvatite kako se stvara mrlja Gram
Identifikacija bakterija pomoću gram bojenja je brza, praktična i jeftina za izradu i bitna je za liječnike jer su poznate specifične karakteristike tih skupina bakterija i liječnik može ukazati na preventivno liječenje zasnovano samo na bojenju gram.
Ova boja kao načelo diferencijacija bakterija prema karakteristikama stanične stijenke. Gram-pozitivne bakterije imaju više od jednog debelog zida peptidoglikana koji mogu zadržati prvu boju, dok gram-negativne bakterije imaju tanji zid i mogu se lako obezbijediti kada su izloženi alkoholu.
Gram bojanje se vrši u 5 glavnih koraka, ali protokol može varirati prema laboratoriju:
- Pokrijte nož s ljubičastom kristalnom bojom i pustite da djeluje oko 1 minute;
- Operite oštricu strujom tekuće vode i pokrijte nož s lugolom, koji ima za cilj popraviti plavu boju i ostaviti da djeluje na 1 minutu. Oba tipa bakterija mogu apsorbirati kompleks formiran bojom i lugol, okrećući plavo;
- Zatim oprati oštricom tekućom vodom i nanijeti 95% alkohola, ostavljajući je da djeluje 30 sekundi. Alkohol je odgovoran za otapanje lipidne membrane koja tvori gram-negativne bakterije i na taj način uklanja kompleks formiran između boje i lugola, obezbojenje tih bakterija. Međutim, u slučaju gram-pozitivnih bakterija, alkohol je iscrpljen od stanične stijenke gram-pozitivnih bakterija, što uzrokuje kontrakciju pore i čini ih nepropusnim;
- Zatim isperite pod tekućom vodom i pokrijte oštricu drugom bojom, fuchsinom ili safraninom i pustite da djeluje 30 sekundi;
- Oštrica se zatim treba isprati vodom iz slavine i ostaviti da se osuši na sobnoj temperaturi.
Nakon što je oštrica suha, moguće je staviti kap ulja za uranjanje i promatrati oštricu u mikroskopu sa 100x objektivom. Moguće je provjeriti prisustvo ili prisutnost bakterija, kao i prisutnost kvasaca i epitelnih stanica.
Što znači rezultat?
Cilj rezultata bakterioskopije je ukazati postoji li prisutnost ili odsutnost mikroorganizama, karakteristika i količine, osim analiziranog materijala.
Rezultat je negativan kad se mikroorganizmi ne promatraju i pozitivni kada se mikroorganizmi vizualiziraju. Rezultat se obično ukazuje na križanje (+), gdje 1 + pokazuje da je 1 do 10 bakterija vizualizirano na 100 polja i može biti indikativno za početnu infekciju, na primjer, a 6 + predstavlja prisustvo više od 1000 bakterija po na primjer, što ukazuje na to da liječenje nije djelotvorno.
Osim toga, poznati su podaci o boji koji su korišteni u izvješću, koji mogu biti, na primjer, Gram ili Ziehl-neelsen, uz karakteristike mikroorganizama, kao oblik i raspored, bilo u klasterima ili u lancima, na primjer.
Uobičajeno, kada je rezultat pozitivan, laboratorij identificira mikroorganizam i antibiogram, što ukazuje na koji se antibiotik preporučuje za liječenje infekcije određenom bakterijom.
